[Chapter 5] Introduction of DNA into non-bacterial cells

모든 내용은 Gene Cloning and DNA Analysis, 6th edition, T.A.Brown, Wiley-Blackwell을 참고하여 작성하였습니다.

본 글의 제목은 언급된 도서의 각 챕터의 절 이름과 동일합니다.

대부분의 그림 역시 본 책에서 왔으며, 그 이외에는 따로 표시합니다.

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Chapter 4

Manipulation of Purified DNA

 

5.5 Introduction of DNA into non-bacterial cells

Transformation은 원래 non-viral DNA를 bacteria에 도입하는 것이었으나 지금은 모든 생명체에게 외부 DNA를 도입하는 것의 의미로 쓰임

고등동물로 갈수록 Transformation 방법은 복잡해짐

Transformation of individual cells

Calcium phosphate transfection: Monolayer animal cell 위에 DNA를 calcium phosphate 용액을 이용해 침전시켜 세포에 붙인 후 세포 내로 DNA가 들어가게 함

Liposome-mediated transfection: Animal cell의 원형질막과 같은 조성의 liposome 안에 DNA를 넣고 liposome과 세포를 융합시킴

Protoplast generation: 세포벽을 가진 균류와 식물의 세포벽을 없애 원형질체(protoplast)로 만들면 DNA를 쉽게 흡수함

Electroporation: 진핵세포나 원핵세포 모두에서 transformation 효율을 상승시킬 수 있음. 짧은 전기 펄스를 주면 세포막에 일시적인 구멍이 생겨 DNA가 들어갈 수 있다고 알려짐

Microinjection: 주로 동물세포에, 최근에는 식물세포에도 쓰이는 방법. 비교적 핵이 큰 세포의 경우 아주 가느다란 바늘로 DNA를 직접 핵 내에 찔러넣을 수 있음

Biolistics: DNA로 싸인 금이나 텅스텐 입자인 microprojectile을 Gene Gun으로 세포에 발사하여 주입. 다양한 종류의 세포에 사용 가능

Transformation of whole organisms

식물은 배양한 세포를 이용하여 새로운 DNA를 가진 개체를 만들기가 비교적 쉬움(쌍떡잎식물의 경우)

동물은 모체 내에서의 발달이 필수적이므로 수정란에 DNA를 넣고 대리모의 자궁에 재이식하는 방법을 흔히 씀